Kontaktperson
Francisco Salva Serra
Forskare
Kontakta Francisco
Mutagenicitetstestning
Vissa kemiska föreningar är mutagena – de kan förändra DNA och orsaka allvarliga sjukdomar som cancer. Vid arbete med nya ämnen är det viktigt att bedöma deras mutagena potential. På RISE kan vi erbjuda Ames test, som är ett kostnadseffektivt screeningtest som använder specifika bakteriestammar för att upptäcka mutagenicitet för ett visst ämne.
Syfte
Syftet med Ames test är att identifiera om ett ämne har mutagen potential, det vill säga förmåga att orsaka genetiska förändringar. Testet används som ett första steg i riskbedömning av kemiska föreningar. Genom att använda särskilda bakteriestammar kan man på ett snabbt och kostnadseffektivt sätt upptäcka ämnens förmåga att inducera mutationer.
Metod
Det bakteriella reversionstestet (även känt som Ames-testet) använder bakteriestammar av Salmonella typhimurium och/eller Escherichia coli för att avgöra om ett ämne är mutagent. Stammarna bär på tidigare introducerade punktmutationer som gör att de inte kan syntetisera en essentiell aminosyra. Därför kräver de att aminosyran finns i odlingsmediet. Testet identifierar mutationer som återställer bakteriernas förmåga att syntetisera aminosyran. Dessa s.k. ”revertanter” detekteras genom sin förmåga att växa i medium utan aminosyran.
Hos RISE erbjuder vi en förenklad version av metoden som beskrivs i OECD:s testriktlinje nr 471 (Bacterial Reverse Mutation Test). I denna version används två stammar av S. typhimurium (TA98 och TA100). Dessa stammar har punktmutationer i histidinoperonet: en läsramsskift i TA98 och en basparsutbyte i TA100, vilket gör dem oförmögna att syntetisera histidin.
Testet innebär exponering av stammarna för sex koncentrationer av testämnet, både med och utan metabolisk aktivering. Därefter inkuberas bakterierna i medium utan histidin. En dosberoende ökning av antalet revertanter indikerar att ämnet är mutagent under testförhållandena.
Leverans
Metoder och resultat presenteras i skriftlig rapport.
